آزمایش های مطالعه آنتی بادی های پلی کلونال اسب علیه انواع SARS-CoV-2

مطالعه اخیر منتشر شده در مجله بیماریهای عفونی آنتی بادی های پلی کلونال اسب را علیه سندرم حاد تنفسی ویروس کرونا 2 (SARS-CoV-2) آزمایش کرد.

زمینه

SARS-CoV-2 که عامل بیماری کروناویروس 2019 (COVID-19) است، تا به امروز باعث بیش از 577 میلیون مورد و 6.4 میلیون مرگ در جهان شده است. ادامه انتقال SARS-CoV-2 منجر به ظهور گونه های نگران کننده جهش یافته (VOCs) شده است. SARS-CoV-2 Omicron، جدیدترین VOC، قابلیت انتقال افزایش یافته را نشان می‌دهد و از خنثی‌سازی توسط آنتی‌بادی‌ها اجتناب می‌کند، که مانع بزرگی برای محدود کردن همه‌گیری COVID-19 است.

آنتی بادی های مونوکلونال متعدد (mAbs) برای درمان کووید-19 در بیماران منتخب برای استفاده اضطراری توسط آژانس دارویی اروپا (EMA) و سازمان غذا و داروی ایالات متحده (FDA) تایید شده است. با این حال، اکثر mAb ها در برابر Omicron ناکارآمد بوده اند. علاوه بر این، چندین نوع جدید از Omicron اخیراً پدیدار شده‌اند که حساسیت‌های متفاوتی به mAbs نشان می‌دهند و کاربرد داروهای آنتی‌بادی را پیچیده می‌کنند.

ایمونوگلوبولین های هترولوگ به عنوان درمانی برای هاری، کزاز و مسمومیت استفاده می شوند. FBR-002 شرکت Fab’entech یک محصول با درجه بالینی از قطعات خالص شده آنتی ژن پلی کلونال اسب است. [F(ab’)₂] که پروتئین اسپایک SARS-CoV-2 را تشخیص می دهد. این یک کاندید بالقوه برای درمان بیماران بستری در بیمارستان با COVID-19 است.

چندین اپی توپ سنبله را هدف قرار می دهد و در صورت ظهور جهش یافته های جدید، خطر فرار را به حداقل می رساند. عدم وجود قطعه قابل تبلور (F_جمنطقه خطر افزایش وابسته به آنتی بادی (ADE) و سایر عوارض مرتبط را در مقایسه با ایمونوگلوبولین های کامل محدود می کند.

مطالعه و یافته ها

در پژوهش حاضر محققین مورد ارزیابی قرار گرفتند درونکشتگاهی خنثی سازی VOCs SARS-CoV-2 توسط FBR-002. سه اسب تروتر فرانسوی با پروتئین کامل سنبله hyperimmunized شدند. اسب‌ها فاقد آنتی‌بادی‌های ضد SARS-CoV-2 قبل از ایمن‌سازی بودند و نمونه‌های خون به طور منظم پس از ایمن‌سازی گرفته می‌شد.

پلاسمای تلفیقی برای به دست آوردن F(ab’) در معرض خالص سازی قرار گرفت.₂ قطعات خالص سازی شامل 1) کروماتوگرافی تبادل آنیون، 2) هیدرولیز کل ایمونوگلوبولین ها برای حذف F_ج قطعات و پاستوریزه در دمای 60 درجه سانتیگراد به مدت 10 ساعت. محصول نهایی از طریق 0.2 میکرون فیلتر شده و در دمای 5 درجه سانتی گراد نگهداری شد.

سنجش های خنثی سازی علیه VOC های SARS-CoV-2 مانند آلفا، بتا، گاما، دلتا و اومیکرون انجام شد. [BA.1, BA.2, BA.2.12.1, BA.4/5] انواع با اسپایک SARS-CoV-2 D614G به عنوان مرجع، با استفاده از سیستم ویروس لوسیفراز استوماتیت تاولی نوترکیب SARS-CoV-2 (PSV).

علاوه بر این، یک سنجش میکروخنثی‌سازی با استفاده از انواع معتبر SARS-CoV-2 D614G و دلتا، BA.1 و BA.4 انجام شد. FBR-002 در سنجش خنثی سازی (PSV) فعالیت خنثی کننده بالایی را در برابر همه VOCs SARS-CoV-2 نشان داد. تیتر خنثی سازی برای D614G (مرجع) 546827 IU/ml بود و از 0.5 x 10 متغیر بود.⁵ به 6*10⁵ IU/ml برای SARS-CoV-2 VOCs.

تیتر خنثی سازی برای SARS-CoV-2 BA.1، BA.2، BA.2.12.1، و BA.4/5 107355 IU/ml، 127229 IU/ml، 87193 IU/ml و 65082 IU/ml بود. ، به ترتیب. خنثی‌سازی انواع منتخب SARS-CoV-2 در سنجش میکروخنثی‌سازی مشابه با روش PSV بود.

برون‌یابی تخمین‌های خنثی‌سازی به‌دست‌آمده با FBR-002 بر اساس محتوای ایمونوگلوبولین تقریباً به غلظت نیمه حداکثر بازداری ترجمه می‌شود (IC₅₀81.9 ng/ml برای نوع D614G در سنجش PSV و 87.5 ng/ml در سنجش ریزخنثی سازی.

به همین ترتیب، برای Omicron BA.4/5 در سنجش PSV 668 نانوگرم بر میلی‌لیتر و برای نوع BA.4 در سنجش ریزخنثی‌سازی 734.2 نانوگرم بر میلی‌لیتر بود که با توجه به در دسترس بودن محدود mAbs در برابر زیر Omicron قابل توجه است. انواع

نتیجه گیری

نویسندگان خنثی‌سازی قوی SARS-CoV-2 توسط FBR-002 را نشان دادند که از قدرت خنثی‌کننده‌ای که پس از عفونت یا واکسیناسیون SARS-CoV-2 به دست آمد، برتر بود. تیترهای خنثی کننده بالای 10 بود⁵ IU/ml برای اکثر VOCها. قابل توجه، در مقایسه با سنبله D614G، گونه های (زیر) Omicron بیشترین کاهش در خنثی سازی را داشتند.

کاهش 6.3 و 8.4 برابری در خنثی سازی برای Omicron BA.4 و BA.4/5 به ترتیب نسبت به D614G در روش PSV مشاهده شد. به طور مشابه، تیم کاهش 8.4 برابری در تیترهای خنثی کننده نوع BA.4 را نسبت به نوع D614G در سنجش میکروخنثی‌سازی مشاهده کردند. در مقایسه، این (تیتر) دو برابر بیشتر از تیترهای خنثی‌سازی به‌دست‌آمده با سرم‌های افراد ساده لوح/درحال نقاهت با واکسن تقویت‌شده بود.

تیتر بالای آنتی بادی هایی که اپی توپ های حفاظت شده مختلف را در پروتئین سنبله هدف قرار می دهند ممکن است به طور قابل قبولی وسعت قابل توجه فعالیت خنثی کننده مشاهده شده با FBR-002 را توضیح دهد. قدرت و وسعت آماده سازی آنتی بادی پلی کلونال برای هدف قرار دادن SARS-CoV-2 بسیار در حال تکامل حیاتی است. با توجه به انتقال مداوم، این احتمال وجود دارد که انواع جدیدتر SARS-CoV-2 در آینده ظاهر شوند. در مجموع، این نتایج نشان می دهد که FBR-002 می تواند یک رویکرد درمانی جدید علیه SARS-CoV-2 باشد.