bioRxiv گزارشهای علمی مقدماتی را منتشر میکند که توسط همتایان بررسی نمیشوند و بنابراین، نباید بهعنوان نتیجهگیری، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.
تاثیر عملیات حرارتی بر ویروس آبله میمون چیست؟
نمونهها در دماهای 95 درجه سانتیگراد، 70 درجه سانتیگراد، 60 درجه سانتیگراد و 56 درجه سانتیگراد غربالگری شدند تا دماهای معمولی مورد استفاده برای غیرفعالسازی سریع ویروسی و مناسب با روشهای زیستشناسی مولکولی، غیرفعال کردن MPXV قبل از تشخیص به طور معمول، غیرفعالسازی پاتوژنهای با درمان بالا. ، و سروی های سرمی به ترتیب. علاوه بر این، هر آزمایش از دستورالعمل های ایمنی زیستی سختگیرانه سطح 3 (BSL3) پیروی می کرد.
نتایج
به طور کلی، یافته های مطالعه نشان داد که MPXV در دمای 70 درجه سانتی گراد در کمتر از پنج دقیقه و 60 درجه سانتی گراد در کمتر از 15 دقیقه غیرفعال می شود. هیچ گونه تنوعی بین ویروس های کلاد آفریقای مرکزی و غرب آفریقا وجود نداشت. مشاهدات کنونی می تواند به کارکنان آزمایشگاه در دستکاری ویروس در شرایط بهینه ایمنی زیستی و ساده کردن روش های خود کمک کند.
دو نوع رسانه مجزا، به عنوان مثال، رسانه های انتقال ویروسی (VTM) و FCS، برای رقیق کردن سویه های MPXV به نصف استفاده شد. علاوه بر این، 200 میکرولیتر از هر نمونه در سه تکرار در معرض دماهای مختلف برای مدت زمانی از 30 ثانیه تا 90 دقیقه قرار گرفت. در یک حمام آب خشک کالیبره شده و معتبر، نمونهها غیرفعال و با استفاده از یخ خنک شدند. محققان سپس عفونت آنها را با تجزیه و تحلیل پلاک بررسی کردند.
در مقاله اخیر ارسال شده به bioRxiv* سرور پیش چاپ، محققین غیرفعال شدن ویروس آبله میمون (MPXV) را با عملیات حرارتی تعیین کردند.

زمینه
آزمایش ها با استفاده از رده های سلولی Vero E6 انجام شد. در میان دو سویه MPXV مورد استفاده، یکی از حوضه کنگو (LK تعیین شده برای منطقه Lokole) و دیگری از یک بیمار انسانی در فرانسه جدا شده در ژوئن 2022 (سویه MPXV/2022/FR/CMIP به نام CMIP2022) بود. علاوه بر این، ویروس با استفاده از آزمایش پلاک تیتر شد.
نکته قابل توجه، نویسندگان ذکر کردند که آزمایشهای بیشتری برای ارزیابی ماندگاری MPXV روی ماتریسهای مختلف در دماهای مختلف و بررسی عملکرد احتمالی سطوح آلوده در انتقال ویروس مورد نیاز است.
*تذکر مهم
از زمان شناسایی MPXV در سال 1958، تعداد فزاینده ای از موارد آبله میمون در 50 سال گذشته در 10 کشور آفریقایی و چهار کشور غیر آفریقایی ثبت شده است. وجود این تعداد نمونه MPXV در خارج از آفریقا بسیار استثنایی است، که بر نیاز به پاتوژنز و انتقال ویروس را درک کنید.
موارد متعددی از آبله میمون در کشورهای غیر بومی از آوریل 2022 ثبت شده است. این شیوع غیرمعمول با MPXV، متعلق به ارتوپاکس ویروس جنس و Poxviridae خانواده. بیشتر موارد تایید شده، در مجموع 31800 مورد در 9 اوت 2022، مربوط به منطقه اروپایی سازمان بهداشت جهانی (WHO) است. مردانی که با مردان دیگر رابطه جنسی دارند و رابطه جنسی اخیر با شرکای جدید یا متعدد را گزارش کرده اند، بیشتر در معرض ابتلا هستند.
نتایج مطالعه نشان داد که دو سویه MPXV تجزیهوتحلیلشده در اکثر موقعیتها غیرفعال میشوند، مانند دمای ۷۰ درجه سانتیگراد زیر پنج دقیقه و ۶۰ درجه سانتیگراد زیر ۱۵ دقیقه. استثناها کسانی بودند که به مدت 30 ثانیه در دمای 95 درجه سانتیگراد و 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتیگراد قرار گرفتند. MPXV بعد از 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتیگراد عفونی باقی ماند، که نشان می دهد حداقل یک ساعت غیرفعال سازی حرارتی برای محصولات سرمی لازم است تا سرم های با تیتر بالا را کاملاً بی اثر کنند.
دستکاری نمونه های بالینی و انجام تحقیقات ویروسی برای مبارزه با شیوع فعلی و متوقف کردن آن ضروری است. بنابراین، تکنیکهای غیرفعالسازی ویروسی برای فعال کردن محیطهای آزمایشگاهی ایمن مورد نیاز است.
یک روش متداول غیرفعال سازی ویروس، عملیات حرارتی است. گرما معمولاً به نمونههای بیولوژیکی، تجهیزات حفاظت فردی (PPE)، تجهیزات بیمارستانی، مواد آزمایشگاهی و رسانههای حملونقل برای غیرفعال کردن ویروسها اعمال میشود. در حال حاضر اطلاعات غیر فعال سازی گرما در ارتوپاکس ویروس ها فقط برای ویروس های واریولا و واکسینیا موجود است. به دلیل ساختارهای مشابه، MPXV و ویروس واکسینیا ممکن است به همان اندازه در برابر غیرفعال سازی حرارتی آسیب پذیر باشند، همانطور که قبلا در مورد یک عامل بیوسیدال دیده شد.
در مورد مطالعه
این نتایج نشان میدهد که MPXV در محیطهای آزمایشگاهی تا حدودی نسبت به غیرفعال شدن گرما حساس است. این دادهها میتوانند به پرسنل آزمایشگاه در تقویت پروتکلهایشان کمک کنند و به عنوان پایهای برای درک استراتژیهای بقای MPXV در خارج از میزبانها عمل کنند.
نتیجه گیری
نتایج کمی واکنش زنجیره ای پلیمراز (qPCR) نشان داد که عملیات حرارتی به طور ضعیفی بر سنجش اسید دئوکسی ریبونوکلئیک ویروسی (DNA) بعدی توسط qPCR تأثیر می گذارد، با انحراف در آستانه چرخه (Ct) که از 3.46 در 95 درجه سانتی گراد و 2.09 در 60 درجه سانتی گراد و 70 درجه سانتی گراد تجاوز نمی کند. . این استنتاج نشان داد که نسبت قابل توجهی از DNA ویروسی در بین ذرات ویروس بدون تغییر باقی مانده است.
در تحقیق حاضر، محققین دو نوع محیط را با دو سویه MPXV مجزا در دماهای مختلف گرم کردند که معمولاً در آزمایشگاهها برای غیرفعال کردن ویروسها برای مدتهای مختلف استفاده میشود. متعاقباً، تیم از روش سنجش پلاک برای ارزیابی سویهها برای عفونت باقیمانده استفاده کرد.