در مقاله اخیر منتشر شده در PLoS ONE ژورنال، محققان نشان دادند که پروتئین‌های نوکلئوکپسید (N) و اسپایک (S) با سندرم حاد تنفسی کرونا 2 (SARS-CoV-2) سلول‌های γδ T و سلول‌های دندریتیک (DCs) را فعال نمی‌کنند.
مطالعه: پروتئین‌های SARS-CoV-2 و نوکلئوکپسید نمی‌توانند سلول‌های دندریتیک انسانی یا سلول‌های T γδ را فعال کنند. اعتبار تصویر: Kateryna Kon/Shutterstock
زمینه
دانشمندان کشف کردند که پروتئین S تولید TNF-α یا IL-12 توسط DC با ساقه مونوسیت را فعال نمی کند. از سوی دیگر، LPS، یک آگونیست گیرنده 4 (TLR4) متفاوت، DC را برای تولید سیتوکین‌های قوی و تحریک متوالی سلول‌های γδ T تحریک کرد. از آنجایی که پروتئین SARS-CoV-2 S در برانگیختن DC در تنظیم فعلی ناکام است، نشان می‌دهد که DC ناشی از مونوسیت‌ها و ماکروفاژها به بستن TLR4 واکنش متفاوتی نشان می‌دهد یا اینکه اشکال مختلف LPS DC و ماکروفاژها را متفاوت فعال می‌کنند.
نتیجه گیری
واکنش ایمنی میزبان به SARS-CoV-2 به طور قابل توجهی بر نتایج بیماری کروناویروس 2019 (COVID-19) تأثیر می گذارد. SARS-CoV-2 شدید با فعال شدن و مهاجرت نوتروفیل ها و ماکروفاژها به ریه ها و افزایش سطح سرمی سیتوکین ها و کموکاین ها مانند اینترلوکین-6 (IL-6)، IL-1β، اینترفرون-γ (IFN-γ) مرتبط است. پروتئین 10 (IP-10؛ همچنین به عنوان CXCL10) و فاکتور نکروز تومور-α (TNF-α) استخراج شد. همچنین با خستگی عملکردی و تخلیه سلول‌های CD4 و CD8 T در گردش، سلول‌های B، سلول‌های کشنده طبیعی (NK)، سلول‌های T کمکی فولیکولی، و سلول‌های T ذاتی مانند سلول‌های T ثابت مرتبط با مخاط (MAIT)، T کشنده طبیعی مرتبط است. سلول های (NKT) و سلول های γδ T. در حالی که سلول های γδ T ممکن است در محافظت در برابر SARS-CoV-2 نقش داشته باشند، مکانیسم پشت این فرآیند ناشناخته است.
در مورد مطالعه
در کار حاضر، محققان دو پروتئین ساختاری SARS-CoV-2، S و N را مورد بررسی قرار دادند که پپتیدهای ایمنی زا را برای شناسایی توسط سلول‌های T معمولی فراهم می‌کردند. این برای تعیین اینکه آیا آنها می توانند زیرمجموعه های سلول T γδ انسانی، مانند سلول های T Vδ2 و Vδ1 را به طور مستقیم یا در مجاورت سلول های دندریتیک (DC) تحریک کنند. این تیم تجزیه و تحلیل کردند که آیا پروتئین های N یا S می توانند تولید سیتوکین توسط سلول های γδ T را با یا بدون DCs تحریک کنند.
نویسندگان بر لزوم انجام تحقیقات اضافی با استفاده از ویریون های SARS-CoV-2 به جای پروتئین های نوترکیب S و N تاکید کردند. این برای تعیین اینکه آیا SARS-CoV-2 می‌تواند مستقیماً سلول‌های γδ T را فعال کند یا اینکه ابتدا باید باعث تولید سیتوکین‌ها یا لیگاندهای تحریک‌کننده سلول T γδ توسط سایر سلول‌های ایمنی ذاتی مانند DC شود.
منبع در مجموع، یافته‌های مطالعه نشان می‌دهد که پروتئین‌های SARS-CoV-2 S و N سلول‌های DC یا γδ T را تحریک نمی‌کنند. این تیم پیشنهاد می‌کند که شناسایی ایمنی سایر پروتئین‌های ساختاری SARS-CoV-2 یا RNA ویروسی توسط سلول‌های γδ T یا سایر سلول‌های ایمنی، از جمله DC، که لیگاندهای تحریک‌کننده سلول T γδ یا سیتوکین‌ها را آزاد می‌کنند، چیزی است که باعث فعال شدن سلول T γδ در SARS می‌شود. -بیماران CoV-2.
در ابتدا، نویسندگان متوجه شدند که پروتئین SARS-CoV-2 N باعث تولید IL-12 قوی توسط DC و تحریک بعدی سلول‌های T Vδ2 و Vδ1 می‌شود. با این وجود، هضم پروتئاز پروتئین N این عمل را متوقف نکرد. قرار گرفتن در معرض یک آماده سازی پروتئین N دوم هیچ اثر تحریکی بر روی سلول های γδ T یا DC نداشت. بنابراین، عملکرد تحریکی مشاهده شده N به احتمال زیاد با مواد غیر پروتئینی آلوده، مانند لیپوپلی ساکارید (LPS) مرتبط بود.
نمونه های خون ضد انعقاد با استفاده از اتیلن دی آمین تترا استیک اسید (EDTA) از دو بیمار COVID-19 در بیمارستان سنت جیمز در دوبلین و داوطلبان سالم سرویس انتقال خون ایرلندی گرفته شد. نکته مهم، پروتئین‌های SARS-CoV-2 N و S نوترکیب برای آزمایش‌ها استفاده شد.
نتایج
جالب توجه است، فعال‌سازی LPS DC منجر به تولید IL-12 و فعال‌سازی متعاقب آن سلول‌های T Vδ2 و Vδ1 شد. این استنباط نشان می دهد که تولید DC سیتوکین ها به تحریک سلول های γδ T کمک می کند و تحریک DC در پاسخ به سنجش اسید ریبونوکلئیک (RNA) می تواند به طور مشابه سلول های γδ T را تحریک کند. انتشار TNF-α و IL-12 توسط DC پس از فعال‌سازی با پلی‌اینوزینیک: پلی‌سیتیدیلیک اسید و تولید متعاقب آن TNF-α و IFN-γ توسط سلول‌های γδ T از این نظریه حمایت می‌کند. بنابراین، سیگنال های تولید شده توسط تحریک سلول های میلوئیدی به احتمال زیاد علت ثانویه تحریک سلول های γδ T در بیماران COVID-19 بود.
نتایج مطالعه نشان داد که پروتئین‌های SARS-CoV-2 N، S، یا پپتیدهای منطبق بر مناطق ایمنی غالب این پروتئین‌ها، مستقیماً سلول‌های Vδ2 یا Vδ1 T را برای تولید TNF-α یا IFN-γ، چه در سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی (PBMC) تحریک نمی‌کنند. ) یا در کل کشت های سلول T γδ. علاوه بر این، پروتئین‌های S، N یا مخلوط‌های پپتیدی به طور خاص بلوغ DC یا تولید سیتوکین را القا نکردند. علاوه بر این، هنگامی که DC هم‌کشت شده با پروتئین‌ها یا پپتیدهای S و N درمان شد، هیچ تحریک TNF-α یا تولید IFN-γ مشاهده نشد.
