پس از اعمال Histoprofile®-Treg پانل انسانی به سه بافت سرطان ریه سلول غیر کوچک (NSCLC) با استفاده از Leica Bond RX، تصاویر چند طیفی با استفاده از Vectra Polaris گرفته شد.
هدف اصلی نشان دادن کاربرد HISTOPROFILE Histalim بود® پانل ایمونوفلورسانس چندگانه انسان و موش Treg برای شناسایی سلول های Treg و Teff در موقعیت.
چه روش هایی استفاده شد؟
در طول مطالعه، روش‌های مختلفی از جمله طراحی پانل و اعتبارسنجی اهداف و پروتکل چندگانه متوالی با Opal به کار گرفته شد.® فلوروفورهای (Akoya Biosciences) روی BOND RX® (لایکا) اسلاید لکه دار.
تصاویر چند طیفی از مدل Xenograft مشتق از بیمار زیر جلدی موش (PDX)، ریزآرایه های بافت انسانی و تومورهای سرطان ریه سلول غیر کوچک (NSCLC) با VECTRA به دست آمد.® اسکنر اسلاید PolarisTM (Akoya Biosciences).
می توانید توضیح دهید که چگونه اعتبار سنجی پانل انجام می شود؟
ایمونوفلورسانس مولتیپلکس با امکان تشخیص هم‌بیان و سازماندهی فضایی چندین هدف در یک معماری بافت حفظ‌شده در یک اسلاید، مزیت فنی می‌دهد.
هدف اصلی شما از مطالعه چه بود؟
اعتبار تصویر: Cerba Research
از زمان شروع پروتکل تا توسعه و تا بازار، کارشناسان پرشور ما راه حل های آزمایشگاهی و تشخیصی تخصصی و شخصی با بالاترین کیفیت را ارائه می دهند. برای کارآمدترین استراتژی برای به فعلیت رساندن محصولات بیوتکنولوژی و دارویی خود و بهبود زندگی بیماران در سراسر جهان با ما شریک شوید.
منبع
اعتبار سنجی پانل با استفاده از مقایسه رنگ آمیزی سیمپلکس و مالتی پلکس انجام می شود. اسلایدهای سیمپلکس برای بیومارکرهای فردی در یک پروتکل سیمپلکس رنگ‌آمیزی شدند و با بخش سریال رنگ‌آمیزی شده با IHC چندگانه مقایسه شدند.
ما تصاویر به‌دست‌آمده با نرم‌افزار INFORM را تغییر داده‌ایم و به ما امکان می‌دهد سلول‌های دو مثبت CD3/CD8 و Tregs (CD3+، CD4+، CD25+، FoxP3+) را با استفاده از ماژول HALO شناسایی کنیم.
سلول های تف پاسخ های ایمنی بهینه را در برابر میکروب های مهاجم و آنتی ژن های تومور تسهیل می کنند. تحت شرایط هموستاتیک، Tregs تحمل محیطی را تشویق می کند.
مطابقت رنگ آمیزی بین لام مولتی پلکس و لام سیمپلکس با اجرای آنالیز با HALO تعیین شد.® پس از دکانولوشن چند طیفی درصد سلول های مثبت از لام سیمپلکس با لام مالتی پلکس مقایسه شد که نتایج رضایت بخشی را برای هر دو HISTOPROFILE به دست آورد.® پانل های ترگ
در طول مطالعه چه نتایجی به دست آمد؟
با این حال، Tregs ممکن است باعث سرکوب عملکرد سلول های Teff در تومورها شود. فعل و انفعالات پیچیده بین Teff و Treg نتیجه پاسخ های ایمنی خاص تومور را تعیین می کند. بقای مطلوب در چندین نوع سرطان با نسبت سلول های Teff به Treg بالا که با روش های مختلف مانند فلوسیتومتری یا ایمونوهیستوشیمی در مقاطع سریال ایجاد شده است، مرتبط است.
تنوع Teff/Treg را می توان به راحتی بین نمونه ها درک کرد.
مطالعه چگونه به یافته های شما کمک کرد و یکی از نتیجه گیری های شما در طول مطالعه چه بود؟
در این مصاحبه، Cerba Research توضیح می‌دهد که چگونه تیم‌هایش توانستند سلول‌های T حافظه ساکن در تومورهای جامد را به لطف ایمونوفلورسانس مالتیپلکس شناسایی کنند.
آیا می توانید با توضیح اینکه چگونه سلول های T به عنوان سلول های موثر عمل می کنند و چرا این مهم است شروع کنید؟
سه نمونه NSCLC با HISTOPROFILE رنگ‌آمیزی شدند® پانل TRM و تصویر برداری با VECTRA® تصاویر چند طیفی اسکن کامل PolarisTM با HALO آنالیز شدند® الف) نمونه ای از پانل مالتی پلکس روی هر یک از سه نمونه NSCLC: CD8 (نارنجی) CD103 (سبز) CD49a (سفید) CD69 (زرد) CD3 (قرمز). نوار مقیاس 40 میکرومتر در ادبیات، TRM با ترکیبات مختلف نشانگرهای مورد استفاده در پانل فنوتیپ شده است. نشانگرها برای تجزیه و تحلیل زیرگروه های مختلف TRM CD8 ترکیب شدند.+/CD103, CD8+/CD49a، CD8+/CD69, CD8+/CD103+/CD69, CD8+/CD103+/CD69+/CD49a در نواحی تومورال و غیر تومورال از سه نمونه انسانی NSCLC ب) تصاویری از HISTOPROFILE® پانل TRM و جمعیت های منفرد با تصویر فلورسنت و ماسک های سلولی مربوطه برای انواع مختلف سلول های TRM نوار مقیاس 100 میکرومتر C) فرکانس سلول های T ساکن حافظه (CD8)+ CD103+در ناحیه تومور (نوارهای آبی) و ناحیه غیر تومورال (نوارهای بنفش) آنالیز شد D) توزیع نرمال شده زیرجمعیت‌های مختلف سلول‌های T ساکن در ناحیه تومور و غیر تومور سه نمونه NSCLC CD8+/CD103+ (آبی) CD8+/CD49a+(بنفش) CD8+/CD69+(سبز کم رنگ)، CD8+/CD103+/CD69+(صورتی) CD8+/CD103+/CD69+/CD49a+(آبی تیره). اعتبار تصویر: Cerba Research
درباره Cerba Research
اسلایدهای سیمپلکس برای هر بیومارکر منفرد در یک پروتکل سیمپلکس رنگ‌آمیزی شدند و با بخش سریال رنگ‌آمیزی شده با HISTOPROFILE مقایسه شدند.® پانل مالتی پلکس TRM هماهنگی رنگ آمیزی بین لام مولتی پلکس و لام سیمپلکس با آنالیز با HALO تعیین شد.® بدون دکانولوشن چندطیفی الف) تصویر مثالی از یک لوزه انسان سالم رنگ آمیزی شده چندگانه بیان مشترک پنج نشانگر در پانل CD103 CD69 CD8 CD3 CD49 a را می توان در بزرگنمایی تشخیص داد. اسلاید سیمپلکس (و HALO مربوطه® ماسک هایی که سلول های مثبت را شناسایی می کنند ج) درصد سلول های مثبت از اسلایدهای سیمپلکس (نوارهای آبی) و پانل مالتی پلکس (نوارهای بنفش) که نمایه های رنگ آمیزی قابل مقایسه بین لام ها را نشان می دهد. دقت پروتکل با تجزیه و تحلیل تکرارپذیری درون اجرا و تجزیه و تحلیل تکرارپذیری بین اجرا تعیین شد (داده‌ها نشان داده نشده است). اعتبار تصویر: Cerba Research
در طول مطالعه، این رویکرد قدرت مؤثر Histoprofile Histalim را نشان می‌دهد® ایمونوهیستوشیمی مالتی پلکس Treg و اینکه چگونه به بهترین وجه برای شناسایی و تعیین کمیت تعداد زیادی از سلول های ایمنی در یک بافت منفرد عمل می کند. این پتانسیل کاربرد قابل توجهی را برای این روش در طیف وسیعی از بافت ها در تنظیمات بالینی و پیش بالینی نشان می دهد.
برای بیش از 35 سال، Cerba Research استانداردهای صنعتی را برای انجام آزمایشات بالینی نمونه تعیین کرده است. امروزه، در سراسر پنج قاره، با تمرکز بر پزشکی دقیق، ما در حال تغییر پارادایم نقش آزمایشگاه مرکزی در تحقیقات پیچیده بالینی هستیم.
سلول‌های T سلول‌های مؤثر ایمنی ضروری هستند و وضعیت اهداف ترجیحی برای تعدیل ایمنی به آنها اختصاص می‌یابد. سلول های T را می توان به عنوان سلول های T موثر (Teff) یا T تنظیم کننده (Treg) طبقه بندی کرد.
محتوای حمایت شده توسط تحقیقات سربا16 مارس 2023بررسی شده توسط لویی کاستل