در این مصاحبه، Cerba Research توضیح می‌دهد که چگونه تیم‌هایش توانستند سلول‌های T حافظه ساکن در تومورهای جامد را به لطف ایمونوفلورسانس مالتیپلکس شناسایی کنند.
آیا می توانید یک نمای کلی از سلول های T حافظه ساکن بافت و نقش آنها در یک محیط بالینی ارائه دهید؟
سلول‌های T حافظه مقیم بافت (TRM) نماینده یک جنس از سلول‌های T هستند که در بافت‌های محیطی قرار دارند و به گردش خون باز نمی‌گردند. همانطور که آنها در بافت جاسازی شده اند، آنها پاسخ اولیه سلول T را در عفونت های موضعی و شرایط التهابی نشان می دهند.
TRM با بیان CD103، CD69 و CD49a متمایز می شوند. TRM نقش اصلی را در توسعه و اثربخشی واکسن های سرطان ایفا می کند و با بهبود پیش آگهی و بقا در تعدادی از سرطان ها مرتبط است. با این حال، مقایسه سلول‌های TRM و سیتوتوکسیک CD8 T در ریزمحیط تومور محدود است.
هدف اصلی شما از مطالعه چه بود؟
ما شروع به توسعه HISTOPROFILE کردیم®– پانل چندگانه TRM برای فنوتیپ سلول های T مقیم حافظه در تومورهای جامد و نشان دادن پتانسیل پانل برای مطالعه زیرجمعیت های TRM در برش بافت NSCLC FFPE. این با استفاده از طراحی و اعتبارسنجی پانل به دست آمد.
اهداف اصلی شما در طول تحقیق چه بود؟
اهداف CD3/CD8/CD49a/CD69/CD103 بودند. سلول های T مقیم حافظه – CD8+/CD103+; و زیر انواع سلول های T مقیم حافظه – CD8+/CD49a+CD8+/CD69+، CD8+/CD103+/CD69+، CD8+/CD103+/CD69+/CD49a+.
برای رسیدن به این هدف، ما سه نمونه برداشتن بافت NSCLC از Biobank Cerba Reseach Montpellier تهیه کردیم. ناحیه تومور NSCLC روی اسلایدهای رنگ آمیزی شده با هماتوکسیلین و ائوزین توسط پاتولوژیست شناسایی شد.
چه روش های کاربردی در طول اعتبار سنجی مطالعه استفاده شد؟
هنگامی که اسلایدها شناسایی شدند، یک پروتکل چندگانه متوالی با Opal® فلوروفورهای (Akoya Biosciences) روی BOND RX اعمال شد® (لایکا) اسلاید لکه دار. پس از این، تصاویر چند طیفی با استفاده از VECTRA گرفته شد® اسکنر اسلاید PolarisTM (Akoya Biosciences) در حالی که تجزیه و تحلیل تصویر کل اسلاید با استفاده از HALO انجام شد.® (آزمایشگاه‌های ایندیکا) ماژول Highplex روی تصاویر NSCLC مخلوط نشده.
آیا می توانید روش تشخیص مورد استفاده در طول تحقیق را توضیح دهید؟
اسلایدهای سیمپلکس برای هر نشانگر زیستی در یک پروتکل سیمپلکس رنگ‌آمیزی شدند و با بخش سریال رنگ‌آمیزی شده با پانل چندگانه HISTOPROFILE®-TRM مقایسه شدند. هماهنگی رنگ‌آمیزی بین لام‌های مالتی پلکس و سیمپلکس با HALO تعیین شد® بدون دکانولوشن چند طیفی دقت پروتکل با تجزیه و تحلیل تکرارپذیری درون اجرا و تجزیه و تحلیل تکرارپذیری بین اجرا تعیین شد (داده‌ها نشان داده نشده است).
چگونه کارایی طراحی پانل را آزمایش می کنید؟
استحکام پانل روی تومورهای جامد مختلف انسانی، از جمله آدنوکارسینوم پروستات، روده بزرگ، ریه و کلیه، لنفوم هوچکین، ملانوم و آدنوکارسینوم تخمدان سروزی نشان داده شد. پس از آن، تصاویر چند طیفی اسکن کامل با استفاده از HALO برای تعیین کارایی روش مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.
آیا می توانید خلاصه کنید که چرا پانل مالتی پلکس برای تشخیص سلول های T حافظه ساکن بافت در تومورهای جامد مناسب است؟
HISTOPROFILE®پانل TRM از نشانگرهای CD8، CD3، CD69، CD103 و CD49a تشکیل شده است و به طور خاص برای تشخیص سلول‌های T ساکن در نمونه‌های NSCLC انسانی توسعه یافته و استفاده می‌شود.
این پانل به طور قدرتمندی ظرفیت جدید برای فنوتیپ کردن TRM را با ترکیب های مختلفی از اهداف موجود نشان می دهد.
زیرجمعیت های مختلف TRM در نواحی تومورال و غیر تومورال را می توان با تجزیه و تحلیل تصویر تعیین کرد. استحکام و استحکام پانل مولتی پلکس آن را به ابزاری عالی برای بررسی جمعیت های TRM در طیف وسیعی از تومورهای جامد انسانی تبدیل کرده است.
اسلایدهای سیمپلکس برای هر بیومارکر جداگانه در یک پروتکل سیمپلکس رنگ‌آمیزی شدند و با بخش سریال رنگ‌آمیزی شده با مالتی پلکس IHC مقایسه شدند. هماهنگی رنگ آمیزی بین لام مولتی پلکس و لام سیمپلکس با آنالیز با HALO تعیین شد.® پس از دکانولوشن چند طیفی الف) تصاویر نمونه (بالا) از یک اسلاید سیمپلکس برای هدف A (چپ) و اسلاید چندگانه (راست) و HALO مربوطه® ماسک شناسایی سلول های مثبت (پایین). ب) نتایج حاصل از تجزیه و تحلیل پنل Treg انسان و موش. درصد سلول های مثبت از اسلاید سیمپلکس (نوار سیاه) با اسلاید مالتی پلکس (نوار سفید) مقایسه می شود. نتایج رضایت بخشی برای هر دو HISTOPROFILE به دست آمد® پانل های ترگ اعتبار تصویر: Cerba Research
اعتبار تصویر: Cerba Research
اعتبار تصویر: Cerba Research
اعتبار تصویر: Cerba Research
اعتبار تصویر: Cerba Research
اعتبار تصویر: Cerba Research
درباره Cerba Research
برای بیش از 35 سال، Cerba Research استانداردهای صنعتی را برای انجام آزمایشات بالینی نمونه تعیین کرده است. امروزه، در سراسر پنج قاره، با تمرکز بر پزشکی دقیق، ما در حال تغییر پارادایم نقش آزمایشگاه مرکزی در تحقیقات پیچیده بالینی هستیم.
از زمان شروع پروتکل تا توسعه و تا بازار، کارشناسان پرشور ما راه حل های آزمایشگاهی و تشخیصی تخصصی و شخصی با بالاترین کیفیت را ارائه می دهند. برای کارآمدترین استراتژی برای به فعلیت رساندن محصولات بیوتکنولوژی و دارویی خود و بهبود زندگی بیماران در سراسر جهان با ما شریک شوید.