مطالعه پروتئین طعمه آنزیم تبدیل کننده آنژیوتانسین 2 را به عنوان یک عامل امیدوارکننده ضد SARS-CoV-2 نشان می دهد.

از

bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان بررسی نمی‌شوند و بنابراین، نباید به‌عنوان اطلاعات قطعی، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.



منبع

طعمه نوترکیب به طور قابل توجهی بار ویروسی را در موش ها پس از چالش با D614G، Omicron BA.1، و Omicron BA.2 کاهش داد و تکثیر SARS-CoV-2 را در هنگام تجویز پس از عفونت به شدت سرکوب کرد، البته با قدرت کمتر برای Omicron sub-VOCs. این طعمه حفاظت گسترده تری در برابر SARS-CoV-2 با قدرت مشابه در مقایسه با REGN-COV2 و محافظت بیشتر از mAbs LY-CoV1404 ارائه کرد. طعمه ACE2.1mb D614G را با قدرت 10.0 برابر بیشتر از sACE2 خنثی کرد، و قدرت خنثی سازی ACE2.1mb با میل ترکیبی بالا 5.0 برابر بیشتر بود.

برای نتیجه گیری، بر اساس یافته های مطالعه، پروتئین طعمه نوترکیب ACE2.1mb با میل ترکیبی بالا می تواند یک گزینه پیشگیری کننده و درمانی امیدوارکننده در برابر SARS-CoV-2 VOCs و Omicron sub-VOCs باشد.

*اطلاعیه مهم

برای ارزیابی تأثیر مسیر تحویل بر توزیع ACE2.1mb، پروتئین طعمه به صورت داخل صفاقی، IV (داخل وریدی) یا در (داخل بینی) تجویز شد. برای ارزیابی نیمه عمر طعمه in vivoفعالیت لوسیفراز در بافت های ریوی و سرم بررسی شد. به علاوه، in vivo آزمایش‌هایی برای ارزیابی توانایی طعمه ACE2.1mb با میل ترکیبی بالا برای جلوگیری از کووید-19، با تجویز این طعمه از هر دو مسیر در موش‌های hACE2-Tg با hACE2 knock-in انجام شد.

در 1.0 ساعت پس از COVID-19، طعمه تزریق شده به صورت داخل وریدی و داخل بینی، بار ویروسی را به ترتیب 1100 برابر و 27500 برابر کاهش داد. یافته‌های مشابهی در مورد تجویز طعمه پس از شش ساعت عفونت SARS-CoV-2 مشاهده شد. با این حال، پس از 12 ساعت عفونت SARS-CoV-2، پروتئین طعمه تزریق شده به صورت داخل وریدی هیچ اثر قابل توجهی نشان نداد. طعمه تزریق شده از طریق بینی بار ویروسی را 20 برابر کاهش داد و به طور مداوم تا 16 ساعت پس از عفونت حفظ شد.

طعمه بار ویروسی Omicron BA.1 را با تجویز داخل وریدی 56.0 برابر و Omicron BA.2 را 100.0 برابر با تجویز داخل بینی کاهش داد. محافظت بیشتر در مورد تجویز طعمه ≤2.0 روز قبل از COVID-19 مشاهده شد، و حفاظت متوسط ​​در هنگام تجویز در dpi 3.0 (کاهش 200 برابری در بار ویروسی)، بدون محافظت در 5.0 dpi مشاهده شد.

RNA SARS-CoV-2 در طول دوره درمان در ریه ها غیرقابل شناسایی بود. تجویز داخل بینی و داخل وریدی 100 میکروگرم طعمه، تکثیر SARS-CoV-2 را تا سطوح غیرقابل تشخیص سرکوب کرد و 10 میکروگرم از طعمه، تکثیر SARS-CoV-2 را تا 12 برابر سرکوب کرد. تجویز داخل بینی در مقایسه با تزریق داخل وریدی در دوزهای ده میکروگرم و 50 میکروگرم اثر کمی بیشتر نشان داد.

نیمه عمر طعمه تزریقی داخل وریدی یا داخل بینی در سرم پنج روز بود. در بافت های ریوی، نیمه عمر طعمه تزریق شده به صورت داخل وریدی و داخل بینی به ترتیب چهار روز و هشت روز بود. تزریق داخل صفاقی، داخل وریدی و داخل بینی، بار ویروسی را به ترتیب 108 و 15700 برابر و 26500 برابر کاهش داد. ارزیابی هیستوپاتولوژیک بافت‌های ریوی، ارتشاح سلولی ایمونولوژیک برجسته را در بین موش‌های درمان‌نشده نشان داد، که تقریباً در موش‌های تحت درمان با sACE2 وجود نداشت و در بین موش‌های تحت درمان با ACE2.1mb کاملاً وجود نداشت.

ظهور مداوم VOCs (انواع نگران کننده) با سندرم تنفسی حاد ویروس کرونا 2 (SARS-CoV-2) با جهش های متعدد پروتئین SARS-CoV-2 (S) کارایی واکسن ها و آنتی بادی های مونوکلونال را به چالش کشیده است. mAbs) در پیشگیری و مدیریت عفونت SARS-CoV-2.

میل پیوندی طعمه به SARS-CoV-2 S بر اساس سنجش های اتصال ویریون و با ارزیابی اتصال sACE2 (ACE2 محلول) -NLuc (نانولوسیفراز)، ACE2.mb-NLuc، ACE2.1mb-NLuc decoy:nanoluciferase ارزیابی شد. پروتئین هایی با سلول های 293T بیان کننده SARS-CoV-2 S. برای ارزیابی محلی سازی بافتی pcACE2.mb، پروتئین های ACE2.1mb-NLuc و sACE2-NLuc به صورت داخل صفاقی (IP) به موش ها تزریق شد که به مدت 3.0 روز تصویربرداری شدند.

در مطالعه اخیر ارسال شده به bioRxiv* سرور پیش چاپ، محققان یک پروتئین طعمه نوترکیب میکروبادی با میل ترکیبی بالا به آنزیم مبدل آنژیوتانسین 2 (ACE2) را به عنوان گزینه ای برای درمان بیماری کروناویروس 2019 (COVID-19) ارائه کردند.

مطالعه: طعمه گیرنده ACE2 یک پیشگیرانه و درمانی قوی برای SARS-CoV-2 است. اعتبار تصویر: Kateryna Kon/Shutterstock
مطالعه: طعمه گیرنده ACE2 یک پیشگیرانه و درمانی قوی برای SARS-CoV-2 است. اعتبار تصویر: Kateryna Kon/Shutterstock

زمینه

متعاقباً، موش‌ها با SARS-COV-2 USA-WA1/2020 به چالش کشیده شدند و برای ارزیابی‌های مقایسه‌ای، حیوانات با REGN-CoV2، یک کوکتل mAb تحت درمان قرار گرفتند و به دنبال آن اسید ریبونوکلئیک SARS-CoV-2 (RNA) اندازه‌گیری شد. در 3.0 روز پس از تزریق (dpi). موش‌های BALB/c برای ارزیابی کارایی این طعمه در برابر Omicron BA.1 و BA.2 sub-VOCs در مقایسه با موش‌های کنترل تحت درمان با mAb LY-CoV1404 یا کوکتل REGN-COV2 مورد استفاده قرار گرفتند.

نتایج

قدرت pcACE2.mb با ترکیب جهش‌های T27Y/L79T/N330Y در پروتئین S که اتصال S-ACE2 را افزایش می‌دهد، افزایش یافت. علاوه بر این، دامنه IgG1 CH3 pcACE2.mb برای افزایش نیمه عمر کوتاه شد. پروتئین طعمه با استفاده از سلول‌های ExpiCHO ترانسفکت شد و با استفاده از کروماتوگرافی اندازه و میل ترکیبی خالص شد. سنجش‌های خنثی‌سازی لنتی‌ویروس کاذب برای ارزیابی اثربخشی ضد SARS-CoV-2 pcACE2.mb انجام شد.

در مطالعه حاضر، محققان تجزیه و تحلیل قبلی خود را با اصلاح pcACE2.mb و آزمایش اثربخشی آن در برابر VOCs SARS-CoV-2 در موش گسترش دادند.

برای کاهش بار COVID-19 به گزینه های پیشگیری و درمانی مؤثرتری نیاز است. نویسندگان مطالعه حاضر قبلاً پروتئین فریب گیرنده pcACE2.mb را علیه SARS-CoV-2 ساخته بودند که به طور قوی سویه SARS-CoV-2 D614G و VOCs را با اتصال به SARS-CoV-2 S خنثی می کرد و از اتصال S جلوگیری می کرد. پروتئین با ACE2 انسانی (hACE2).

در مورد مطالعه

علاوه بر این، طعمه میکروبادی ACE2.1mb با میل ترکیبی بالا نیز در برابر آلفا VOC، بتا VOC، گاما VOC، و دلتا VOC بسیار قوی بود اما اتصال چهار و شش برابر کمتر به پروتئین های S Omicron BA.1 و را نشان داد. Omicron BA.2 به ترتیب. در موش هایی که به صورت داخل صفاقی و داخل وریدی تزریق شدند، طعمه عمدتاً در سرم، کبد و طحال موضعی شد و نکته قابل توجه، تجویز داخل وریدی منجر به افزایش 100 برابری محلی سازی طعمه در پرتاب های ریوی شد. تزریق داخل بینی طعمه را در نای و ریه موضعی کرد.