واکسن‌های نوترکیب داخل بینی مبتنی بر MVA بر علیه انواع SARS-CoV-2 در موش

تیترهای آنتی بادی خنثی کننده متقابل قابل مقایسه در سرم موش hACE2 تلقیح شده با دوزهای VOC زیر کشنده مشاهده شد. علاوه بر این، پس از دو واکسیناسیون rMVA-W، یک واکسیناسیون rMVA-D یا واکسیناسیون rMVA-B باعث افزایش خنثی سازی سویه Wuhan-Hu-1 شد.

نویسندگان مطالعه حاضر قبلاً گزارش دادند که در تجویز rMVA-W، واکسن rMVA که پروتئین S سویه Wuhan-Hu-1 اجدادی را بیان می کند، لنفوسیت های T اختصاصی آنتی ژن و همچنین بسیاری از پپتیدهای مثبت موجود در SARS- را تحریک می کند. پروتئین های VOC S CoV-2. این روش تجویز واکسن از عفونت های CoV-W در مقایسه با تزریق IM با سرعت بیشتری جلوگیری کرد یا از بین برد.

در مورد مطالعه

سویه USA-WA1/2020، Beta VOC و Delta VOC کشنده بودند، در حالی که Omicron VOC کشندگی کمتری را نشان داد و تیترهای Omicron کمتری در دستگاه تنفسی موش مشاهده شد. با این حال، سطح sgRNA ها در موش های آلوده به VOC های مختلف SARS-CoV-2 قابل مقایسه بود.

پس از آن، موش ها با rMVAs-W، -D و -O واکسینه شدند. خنثی سازی شبه ویروس SARS-CoV-2 ناهماهنگ و منطبق به طور نسبی مورد ارزیابی قرار گرفت.

واکسن های مبتنی بر MVA از VOC های SARS-CoV-2 محافظت می کنند

با این وجود، واکسیناسیون rMVA-W از موش های تراریخته در برابر کاهش وزن و مرگ و میر محافظت کرد و تکثیر SARS-CoV-2 را برای بیش از نه ماه در دستگاه تنفسی موش کاهش داد. علاوه بر این، هیچ تکرار سویه Wuhan-Hu-1 در ریه موش مشاهده نشد و تکثیر VOC به طور قابل توجهی در مقایسه با حیوانات کنترل کاهش یافت.

ایمن‌سازی مضاعف rMVA-O برای افزایش خنثی‌سازی Omicron در موش‌های واکسینه شده و ساده با rMVA-W مورد نیاز بود. تیترهای sgRNA در موش‌های تراریخته K18-hACE2 محافظت بیشتر ناشی از واکسیناسیون IN rMVA-W را در مقایسه با زمانی که واکسن توسط IM تجویز می‌شد، با تیترهای IgA هدف‌دار آنتی‌ژن و خوشه‌های ریوی متعدد با تمایز 8+ (CD8+) Tlymp تایید کرد. .

نتیجه گیری

موش‌های C57BL/6 و موش‌های K18-hACE2 به‌دست آمدند و ویروس‌های rMVA-بتا VOC (B)، rMVA-Delta VOC (D) و rMVA-Omicron VOC (O) ساخته شدند. علاوه بر این، سلول های Vero E6 و سلول های hACE2 پروتئاز گذرنده Vero E6 سرین 2 (hTMPRSS2) برای درونکشتگاهی آزمایش‌هایی که در آن سلول‌ها با سویه SARS-CoV-2 ایالات متحده آمریکا (USA)-WA1/2020، Beta VOC، Delta VOC و Omicron BA.1 VOC آلوده شدند. دوز عفونی کشت بافت 50% (TCID50) مقادیر متعاقبا محاسبه شد.

rMVA به صورت IM به پاهای عقب موش تزریق شد، و ایمنی زایی واکسن با تزریق IN واکسن‌های همسان و ناهماهنگ rMVA مقایسه شد. پس از عفونت، وضعیت عوارض و/یا مرگ و میر و وزن بدن تا دو هفته کنترل شد.

در مطالعه حاضر، محققان تجزیه و تحلیل قبلی خود را با ساخت rMVAs و شبه ویروس های اضافی که پروتئین های VOC S اصلاح شده SARS-CoV-2 را بیان می کنند، گسترش می دهند. در اینجا، آنها توانایی این واکسن‌ها را برای اتصال با پروتئین‌های VOC S SARS-CoV-2 و محافظت از موش‌های آنزیم تبدیل‌کننده آنژیوتانسین 2 (hACE2) میزبان K18 از عفونت SARS-CoV-2 مقایسه می‌کنند.

در مطالعه اخیر ارسال شده به bioRxiv* سرور پیش چاپ، محققان یک ویروس واکسینیا آنکارا (rMVAs) نوترکیب با دامنه میزبان محدود می‌سازند که پروتئین‌های اسپایک (S) چند گونه نگران‌کننده سندرم تنفسی حاد شدید ویروس 2 (SARS-CoV-2) (VOCs) را بیان می‌کند و ایمنی‌زایی واکسن را ارزیابی می‌کند. زمانی که توسط مسیرهای داخل بینی (IN) و عضلانی (IM) تحویل داده می شود.

bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان مورد بررسی قرار نگرفته‌اند و بنابراین، نباید به‌عنوان نتیجه‌گیری، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.



منبع

مطالعه: محافظت پیشرفته در برابر انواع SARS-CoV-2 توسط واکسن‌های مبتنی بر MVA که پروتئین‌های S منطبق یا نامتناسب را بیان می‌کنند که به صورت داخل بینی در موش‌های hACE2 تجویز می‌شود. اعتبار تصویر: Lightspring / Shutterstock.com

نیاز فوری به واکسن‌های جدید COVID-19

مطالعه: محافظت پیشرفته در برابر انواع SARS-CoV-2 توسط واکسن‌های مبتنی بر MVA که پروتئین‌های S منطبق یا نامتناسب را بیان می‌کنند که به صورت داخل بینی در موش‌های hACE2 تجویز می‌شود.  اعتبار تصویر: Lightspring / Shutterstock.com

در هر آزمایش، خنثی سازی شبه ویروس همسان بیشتر از خنثی سازی شبه ویروس ناسازگار بود. علاوه بر این، کمترین تفاوت بین سویه Wuhan-Hu-1 و Delta VOC مشاهده شد، در حالی که بیشترین تفاوت بین Omicron VOC و سویه‌های دیگر بود.

با این وجود، rMVA-O آنتی بادی هایی را ایجاد کرد که خنثی سازی rVSV-O قابل توجهی را نشان داد. با این حال، تیتر آنتی بادی کمتر از تیترهای ضد دلتا ناشی از rMVA-D یا تیترهای ضد Wuhan-Hu-1 ناشی از rMVA-W بود.

علاوه بر این، اسید ریبونوکلئیک (RNA) از بافت‌ها استخراج شد و برای تعیین کمیت پروتئین S هدایت‌شده تک رشته‌ای SARS-CoV-2، نوکلئوپروتئین sg (sgN) و RNA ریبوزومی 18S تحت آنالیز واکنش زنجیره‌ای پلیمراز قطره‌ای دیجیتال (ddCR) قرار گرفت. سطح (rRNA) دو روز و چهار روز پس از عفونت.

ترتیب خنثی سازی VOC برای سویه Wuhan-Hu-1 بالاترین میزان بود و پس از آن VOC های دلتا، بتا و Omicron قرار گرفتند. واکسیناسیون های مکرر rMVA-W خنثی سازی بتا VOC و دلتا VOC را افزایش داد اما با افزایش متوسطی در خنثی سازی Omicron VOC همراه بود. هیچ آنتی بادی مشابه سویه Wuhan-Hu-1 وجود نداشت.

قبل از آزمایش‌های اثربخشی واکسن، پتانسیل عفونت VOCs SARS-CoV-2 در موش‌های تراریخته K18-hACE2 مقایسه شد. این تیم بر توانایی rMVA-W برای القای تیتر آنتی‌بادی خنثی‌کننده متقاطع تمرکز کردند.

ظهور مداوم VOCs SARS-CoV-2 اثربخشی واکسن ها و عوامل درمانی ضد SARS-CoV-2 را تهدید کرده است، بنابراین نیاز به به روز رسانی واکسن های فعلی و توسعه درمان های موثرتر را تضمین می کند. MVA یک واکسن ناقل ویروس واکسن ضعیف شده است که در حال حاضر در آزمایشات بالینی برای چندین عفونت، از جمله بیماری کروناویروس 2019 (COVID-19) مورد بررسی قرار گرفته است.

شناسایی تیترهای آنتی بادی ایمونوگلوبولین G (IgG) و IgA ووهان S، Omicron S و پروتئین S (RBD) با استفاده از سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) انجام شد. علاوه بر این، آزمایش‌های خنثی‌سازی شبه ویروسی مبتنی بر ویروس استوماتیت تاولی نوترکیب (rVSV) برای ارزیابی تیتر آنتی‌بادی خنثی‌کننده VOC انجام شد. بافت‌های ریه، مغز و شاخک بینی موش‌های K18-hACE2 برای تعیین کمیت تیترهای عفونی SARS-CoV-2 مورد بررسی قرار گرفتند.

به طور کلی، یافته‌های مطالعه نشان داد که واکسیناسیون‌های مبتنی بر IN MVA پس از واکسیناسیون با پروتئین‌های S ناهماهنگ و منطبق، ایمنی بیشتری را در برابر SARS-CoV-2 VOCs در موش‌ها ایجاد کرد.

*تذکر مهم

واکسیناسیون rMVA-W باعث ایجاد آنتی بادی های خنثی کننده کمیاب علیه Omicron VOC شد. با این حال، تیترهای قابل توجهی از آنتی بادی های اتصال به پروتئین Omicron S القا شد که تا حدی از انتقال آنتی بادی پس از غیرفعال موش محافظت کرد.