در مقابل، فراوانی لنفوسیت های حافظه کمکی و سیتوتوکسیک (EM) به دنبال واکسیناسیون با افزایش اولیه افزایش یافت. یافته‌ها نشان داد که نامزد واکسن به سمت فنوتیپ EM از فنوتیپ CM تغییر مکان داده است، که ممکن است به ایجاد پاسخ‌های واکسیناسیون قوی و سریع کمک کند.
نتیجه
علاوه بر این، سنجش‌های میکروخنثی‌سازی (NT90) برای ارزیابی توانایی خنثی سازی SARS-CoV-2 سرم های RM واکسینه شده انجام شد. مهار اتصال بین آنزیم مبدل آنژیوتانسین-2 (ACE2) و پروتئین‌های S trimeric VOCs SARS-CoV-2، از جمله پروتئین‌های Omicron sub-VOC (BA.2 sub-VOC، BA.3 sub-VOC، BA. 1 sub-VOC با جهش R246K، و BA.1 sub-VOC با جهش L452R)، ارزیابی شد.
یافته‌های مطالعه نشان داد که رویکرد واکسن چهار ظرفیتی ایمنی گسترده‌ای را در برابر چندین نوع SARS-CoV-2 ایجاد می‌کند. این یافته‌ها می‌تواند به توسعه واکسن برای کاهش بار بهداشت جهانی COVID-19 کمک کند.
*اطلاعیه مهم: bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان بررسی نمی‌شوند و بنابراین، نباید به‌عنوان اطلاعات قطعی، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.
منبع
در مطالعه اخیر ارسال شده به bioRxiv* سرور پیش چاپ، محققان در ایتالیا و ایالات متحده کارآیی و ایمنی زایی واکسن کووید-19 را با سندرم حاد تنفسی چهار ظرفیتی کمکی ارزیابی کردند.
*اطلاعیه مهم: bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان بررسی نمی‌شوند و بنابراین، نباید به‌عنوان اطلاعات قطعی، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.
مطالعه: واکسیناسیون پروتئینی زیرواحد S1 چهار ظرفیتی SARS-CoV-2 پاسخ‌های ایمنی هومورال و سلولی قوی را در کنترل‌کننده‌های رزوس ماکاک آلوده به SIV ایجاد می‌کند. اعتبار تصویر: Blue Planet Studio / Shutterstock
زمینه
طبق گزارش‌ها، واکسن‌های کووید-19 از نوع زیرواحد پروتئین، ایمن و ایمنی‌زا هستند، با سهولت تولید، توزیع، ذخیره‌سازی و حمل‌ونقل در سطح انبوه، و در برابر سایر ویروس‌ها مانند ویروس هپاتیت B (HBV) موفق عمل کرده‌اند. این ویژگی‌ها، نوع واکسن را کاندیدای ایده‌آل برای برابری واکسن جهانی می‌کند، به‌ویژه برای کشورهایی که دسترسی محدودی به واکسن‌های مبتنی بر ناقل ویروسی و اسید ریبونوکلئیک پیام‌رسان (mRNA) دارند.
رویکرد واکسن چهار ظرفیتی پاسخ‌های ایمونولوژیک سلولی و هومورال را القا کرد، با پاسخ‌های لنفوسیت‌های B و T عمدتاً پس از واکسیناسیون تقویت‌کننده به اوج خود رسید. علاوه بر این، واکسن چهار ظرفیتی آنتی‌بادی‌های واکنش متقاطع و خنثی‌کننده را القا کرد. آنزیم مبدل آنژیوتانسین 2 – آنتی بادی های مسدود کننده (آنتی بادی های مسدود کننده ACE2) و پاسخ های سلولی، از جمله لنفوسیت های CD4+ T (T کمک کننده) با هدف S.
کاهش فراوانی لنفوسیت های T کمکی و حافظه سیتوتوکسیک مرکزی (CM)، لنفوسیت های T کمکی و لنفوسیت های T سیتوتوکسیک به دنبال واکسیناسیون اولیه و واکسیناسیون تقویت کننده مشاهده شد.
واکسن های بیماری کروناویروس 2019 (COVID-19) به طور موثر عوارض و مرگ و میر مرتبط با عفونت SARS-CoV-2 را کاهش داده اند. با این حال، ظهور مداوم VOCs به طور فزاینده قابل انتقال و ایمنی گریز، اثربخشی واکسن را تهدید کرده است. بنابراین، واکسن‌های چند ظرفیتی به‌روز شده که محافظت ایمنی بادوام و وسیعی را ایجاد می‌کنند برای کاهش COVID-19 مورد نیاز است.
نویسندگان این مطالعه قبلاً ایمنی‌زایی واکسن‌های هدفمند S1 را در برابر چندین β-CoV از جمله SARS-CoV، SARS-CoV-2 و سندرم تنفسی خاورمیانه (MERS-CoV) نشان داده‌اند.
در مورد مطالعه
پس از آن، پروتئین ها خالص شده و به طور موقت در سلول های Expi293 بیان شدند. آزمایش‌های ترانسفکشن انجام شد، پس از آن، سوپرناتانت‌ها تحت آنالیزهای الکتروفورز ژل سدیم دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید (SDS-PAGE) و وسترن بلات (WB) قرار گرفتند. سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی ماکاک رزوس (RM-PMBCs) در روزهای 1.0، 3.0، 7.0، 10.0، 14.0، 21.0، 24.0، 28.0، 31.0، 35.0، 42.0، 4.0 و 4.0 سی سی روز پس از تولید به دست آمد. تیتر نقطه پایانی آنتی بادی ضد ووهان-هو-1 ایمونوگلوبولین G (IgG) (EPT) با استفاده از سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) تعیین شد.
در مطالعه حاضر، محققان ایمنی‌زایی یک واکسن چهار ظرفیتی SARS-CoV-2 S1 را که Wuhan-Hu-1، آلفا، بتا و گاما S1 را هدف قرار می‌دهد، در بین RMs ارزیابی می‌کنند. آلوده به SIV
این تیم رنگ‌آمیزی سیتوکین داخل سلولی را برای ارزیابی پاسخ‌های لنفوسیت T ضد S در میان لنفوسیت‌های T هیپر و سیتوتوکسیک انجام دادند. علاوه بر این، سطح سیتوکین‌های فاکتور نکروز تومور آلفا (TNF-α)، اینترفرون گاما (IFN-γ) و اینترلوکین-2 (IL-2) مورد ارزیابی قرار گرفت. فلوسیتومتری برای تعیین تعداد سلول های ایمونولوژیک سرولوژیکی به صورت مطلق انجام شد.
نتایج
شامل سویه Wuhan-Hu-1 و انواع SARS-CoV-2 نگرانی (VOCs) آلفا، بتا، و گاما S1 پروتئین، در یک مدل پستانداران غیر انسانی (NHP) از ماکاک های رزوس (RM) با نقص ایمنی کنترل شده میمون عفونت ویروسی (SIV)
این تیم با تعیین تعداد لنفوسیت‌های B و T، پاسخ‌های لنفوسیتی به واکسیناسیون را به مدت دو ماه پس از واکسیناسیون اولیه نشان داد. آنها سطوح نشانگر فعال سازی لنفوسیت T و تعداد زیر مجموعه لنفوسیت های حافظه را در بین سلول های تک هسته ای خون محیطی (PBMCs) بررسی کردند. نشانگرهای فعال سازی، مانند خوشه تمایز (CD) – 38، -69، و ایزوتیپ آنتی ژن-DR لکوسیت انسانی (HLA-DR)، برای تجزیه و تحلیل استفاده شد.
این واکسن همچنین آنتی بادی هایی را علیه انواع وحشی (WT)، بتا و دلتا ایجاد کرد. پاسخ های لنفوسیت T Ant-S CD4+ در PBMC های RM، با سطوح سیتوکین متغیر، پس از 42.0 روز از واکسیناسیون اولیه مشاهده شد. اگرچه، هیچ پاسخ لنفوسیتی CD8 + T (سیتوتوکسیک T) مشاهده نشد. تعداد لنفوسیت های CD8+ T پس از واکسیناسیون تقویت کننده بیشتر بود. افزایش بیان CD38، CD69، Ki-67، و HLA-DR در زیر مجموعه های لنفوسیت T مشاهده شد.
علاوه بر این، بیان نشانگر تکثیر Ki-67 مورد ارزیابی قرار گرفت. قبل از واکسیناسیون، RM ها با SIV هایی که به طور طبیعی میمون های سبز آفریقایی (SIVsab) را آلوده می کنند، آلوده شدند. RMها واکسن‌های اولیه و تقویت‌کننده در هفته 3.0 با پروتئین‌های نوترکیب SARS-CoV-2 ووهان-هو-1، آلفا، بتا و گاما اسپایک، مخلوط با ادجوانت مبتنی بر اسکوالن AddaVaxTM انجام شدند. ناقل‌های بیان‌کننده پروتئین‌های نوترکیب SARS-CoV-2 ساخته شدند و سازه‌های پلاسمیدی با توالی‌یابی دی‌اکسی ریبونوکلئیک اسید (DNA) تأیید شدند.
واکسن چهار ظرفیتی می‌تواند آنتی‌بادی‌های مسدودکننده ACE2 و اتصال Omicron S را بدون واکسیناسیون با Omicron القا کند، که نشان‌دهنده محافظت گسترده ایمنی در برابر انواع SARS-CoV-2 است.